Aceste informații sunt destinate specialiștilor din domeniul sănătății publice și al produselor farmaceutice. Pacienții nu ar trebui să utilizeze aceste informații ca sfaturi sau sfaturi medicale.
Determinarea numărului de eritrocite și leucocite
Echipamente și reactivi:
1. Mixere (melanje) sau tuburi de testare pentru numărarea celulelor roșii din sânge și a leucocitelor.
2. 3% soluție de NaCl (pentru diluarea eritrocitelor) sau lichid de Guyema.
3. soluție 3% de acid acetic.
4. Camera de numărare.
Mixere sunt pipetă capilare cu fiole de talon rasshireniem-, facilitează amestecarea cu lichidul de diluare de sânge. Malaxoare concepute pentru numărarea eritrocitelor, au un calibru capilar mai subțire și etichete mai voluminoase fiole aplicate acestora unul - 0,5 altul - în fața fiolă - 1,0, al treilea - la ieșirea din fiolă - 101.
Când atrageți sânge până la nota de 0,5, acesta va fi diluat de 200 de ori, când se formează până la 1,0 - 100 de ori. Pentru diluarea eritrocitelor se aplică 3% soluție de sare de masă sau lichid Guyema, în care forma eritrocitelor este mai bine conservată. Mixerul pentru leucocite are un lumen mai larg al capilarului și o fiolă mai mică. Sunt aplicate trei etichete: 0.5. 1.0 și 11. Aceasta vă permite să diluați sângele în 10 sau 20 de ori (mai des diluat de 20 de ori). Pentru diluția leucocitelor utilizați 3 - 50% soluție de acid acetic. Acidul acetic dizolvă eritrocitele, ceea ce vă permite să numărați numai leucocitele.
Pentru a număra elementele formate, cel mai des folosit este camera de tip Burker cu grilă Goryaev. Camera de numărare constă dintr-o glisantă groasă cu o depresiune specială. În partea inferioară a locașului camerei de numărare este gravată o rețea, în celulele cărora sunt numărate elementele uniforme. Pe marginea depresiunii există înălțimi, în care se aplică un geam de acoperire. Între suprafața inferioară a acestui geam și partea inferioară a depresiunii se formează un spațiu închis, care este o cameră de numărare. Adâncimea camerei corespunde cu 0,1 mm. Camera de numărare a tipului Burker este împărțită în două jumătăți printr-un canal adânc și are pe fiecare jumătate grila Goryaev, care permite imediat numărarea a 2 picături fără umplerea din nou a camerei. Grilă Goriaeva are 225 de pătrate mari (15X15), dintre care 25 sunt împărțite în mici, câte 16; Există, de asemenea, pătrate goale asamblate în grupuri de 4 pătrate. În total, există 100 de pătrate mari goale adunate în 25 de grupuri (5X5). Fiecare parte a unui mic pătrat este de 1/20 mm, iar înălțimea camerei este de 0,10 mm, volumul este de 1/4000 mm3.
Pentru numărare eritrocite ia eritrocite mixer tub de cauciuc uzate, câștigând sânge nasasyvaniem ușor de injecție la semn cu 0,5. de sânge în exces a fost îndepărtat cu hârtie de filtru, după care vârful mixer a fost imersat într-o fiolă de soluție preparată anterior de 3% de sare obișnuită sau soluție Guy nasasyvayut de sodiu și se umple toată eticheta flaconului 101. îndepărta imediat tubul de cauciuc este fixat pe lungimea malaxorului între degetul mare și indexul sau mijloc deget și se agită timp de 3 minute. După aceea, umpleți camera de numărare, drenați
1-2 picături și eliberați o picătură ulterioară pe plasă.
Pentru calcularea leucocitelor din sânge de la locul injectării, pentru a marca un câștig de 0,5, apoi se diluează cu soluție de acid acetic 3% marca 11. agitată puternic timp de 3 minute, apoi a fost turnat
1-2 picături și umpleți camera de numărare. Când lucrați cu eprubete
Pentru a număra globulele roșii sanguine, se toarnă 4 ml soluție 3% de clorură de sodiu sau lichid Guyema și se eliberează 0,02 ml. sânge
o pipetă măsurată de la hemometrul Sali. Pentru a număra celulele albe din sânge într-un tub, se toarnă 0,4 ml de soluție 3 - 5%
acid acetic și 0,02 ml de sânge. Se agită viguros tuburile de testare, apoi se introduce o pipetă în lichid din hemometrul Sali și,
tastând conținutul, umpleți camera de numărare.
Umplerea camerelor de numărare:
O alunecare a capacului de șlefuit bine spălată și șters este aplicată marginilor laterale proeminente. Cu carnea degetului mare, hârtia se freacă, se mișcă în sus și în jos, apăsând tot timpul, până când apar așa-numitele inele Newton. Înainte de a umple camera, amestecați agitatorul puternic. eliberați 2 picături pe hârtia de filtru, iar al treilea umpleți spațiul dintre cameră și alunecarea capacului. Lichidul prin capilaritate este aspirat între ele și umple spațiul deasupra ochiului de plasă. Lichidul la umplerea camerei nu trebuie să curgă în caneluri, dacă bate, apoi este îndepărtat cu hârtie de filtru.
Numărătoare de celule roșii din sânge. Numărarea produc după 1-2 minute (când hematiile sedimentat a camerei), folosind 40X lentilei obiectivului și ocularul 7X, 8X sau lentile și ocularul 15X.
Pentru a nu pierde numărul, aderă la un anumit
secvența de numărare: trecerea de la pătrat la pătrat de
orizontal un rând de la stânga la dreapta, următorul - de la dreapta la stânga. Se consideră că, în plus față de cele din interiorul pătratului, toate celulele roșii sângelui situate pe două rânduri, de exemplu, pe partea stângă și superioară, lăsându-i pe toți cei situați pe partea dreaptă și de jos. Este necesar să numărați eritrocitele în 5 pătrate mari, adică în cele 80 de mici.
Pentru a evita inexactitatea, din cauza distribuției uniforme a sângelui în cameră, alegeți să nu numărați 5 pătrate din apropiere, ci să vă deplasați de-a lungul întregii grătare.
Numărul de eritrocite în 1 mm3 (căutat) se calculează după cum urmează: întotdeauna, în orice calcul, în orice rețea se utilizează un mic pătrat ca unitate de cont. Volumul său, așa cum este indicat, este de 1/4000 mm3. Numărați eritrocitele în 5 pătrate mari (80 pătrate mici), împărțiți acest număr cu 80 și înmulțiți cu 200 (gradul de diluție a sângelui) și cu 4000 (pentru a obține numărul
celule în milimetri cubi întregi), în practică, prin urmare, numărul rezultat este înmulțit cu 10.000 (adăugați patru zerouri).
Exemplu: În 80 de pătrate mici s-au numărat 480 de celule roșii din sânge. Prin urmare, numărul de eritrocite în sânge de 1 mm3 este:
480 * 4000 * 200
------------ = 4 800 000
80
Numărarea leucocitelor. Pentru a obține un rezultat suficient de precis la numărarea leucocitelor necesare pentru a conta cel puțin 100 de pătrate mari (scăzut = 1600). Numărul de leucocite în 1 mm3 obținut după cum urmează: numărul de pătrate mari v3100 numărate, se împarte la 1600 (1, conduce la un pătrat mic) și înmulțit cu 20 (factorul de diluție) și 4000; reducerea substanțială numerele constante ale formulei, numărul de leucocite numărate (la o diluție de 20 de ori), se înmulțește cu 50.
Exemplu: în 100 de pătrate mari se numără 120 de leucocite.
În consecință, numărul de leucocite în 1 mm3 este egal
Evaluarea datelor primite:
O cantitate normală de celule roșii din sânge în MEM 1 de 4.500.000 la 5.000.000 cantitatea medie de leucocite normale în 1 mm3 de la 5000 la 9000 (la limita extrema 4000 la 9000).
Calcularea indicelui de culoare:
Pentru a calcula indicatorul de culoare utilizați următoarea formulă:
Cantitatea de HB găsită este numărul de celule roșii de sânge găsite.
------------------------. -------------------------
numărul normal de număr normal de eritrocite.
Practic, determinarea indicelui de culoare se face prin împărțirea procentului (unităților) de hemoglobină cu două ori primele două cifre ale numărului de celule roșii din sânge. Dacă numărul de celule roșii este mai mic de 1.000.000, procentul de HB este împărțit la două ori cu prima cifră a numărului de eritrocite.
Un frotiu de sânge se face, de obicei, după umplerea ambelor mixere. Ștergeți degetul și bucurați-vă de o nouă picătură de sânge. Sângele este luat pe un tobogan, care trebuie să fie complet degresat. Apoi, un pahar de pământ,
sau un capac din sticlă groasă, care este legat de sticlă primul diapozitiv la un unghi de 45 „în vecinătatea sângelui până când se împrăștie un strat subțire de sticlă lățime lustruit, făcându-l un frotiu. Un frotiu bine realizat de culoare gălbui strălucește. După aceasta, frotiul este fixat.
Fixarea frotiului se face pentru a strânge protoplasma elementelor sanguine și pentru a face frotiul mai stabil. Frotiul uscat în aer este imersat pentru fixare într-un vas cu alcool metilic timp de 1 până la 3 minute. sau într-un amestec de Nikiforov, format din părți egale de alcool etilic și eter, timp de 10-20 minute. La sfârșitul fixării, frotiurile sunt îndepărtate cu pensete și așezate în poziție verticală pe hârtia de filtru pentru uscare.
Vopsirea frotiului se face, de obicei, cu un amestec de mai multe culori. Cea mai folosită frotiu de culoare Romanovsky - Giemsa. Înainte de utilizare, vopseaua este diluată cu apă distilată la o rată de 1 până la 2 picături pe 1 ml de apă. Smearurile sunt așezate pe punți din bastoane de sticlă care se sprijină pe marginile cuvei și se toarnă vopseaua în cantitatea maximă care poate fi păstrată pe sticlă. Durata de colorare este de 30 de minute. După colorare, colorantul este spălat cu un curent de apă și frotiurile sunt așezate vertical pe hârtia de filtru pentru a se usca.
1. Diapozitive din sticlă (degresate).
2. soluție 1% de brilliantcrossylblau (alcool).
3. Alunecare de șlefuire.
4. farfurie Petri.
5. Filtrați hârtia.
6. Bagheta din sticlă.
7. Ulei de imersie.
Pe o sticlă de sticlă absolut degresată se scutură o picătură de soluție alcoolică de 1% din diamant cu o sticlă de sticlă. Sticlă abrazivă
Această picătură este murdară ca și în cazul preparării convenționale
frotiu de sânge. După ce vopseaua sa uscat, se aplică o picătură
sânge și se face o frotiu subțire, care este plasat imediat într-o cameră umedă (vasul Petri cu o bucată de hârtie de filtru umedă încorporată în el). După 3-5 minute, frotiul este îndepărtat, uscat în aer și examinat sub un microscop cu imersie.
Sub microscop, celulele roșii din sânge sunt de culoare galben-verzui; în unele eritrocite există un albastru
ochiuri, uneori limitate și tendențioase, uneori abundente, granulare -
aceasta este reticulocitele.
Numărătoarea reticulocitelor este după cum urmează:
Calcularea formulei leucocitelor:
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: