La examinarea malariei pentru un număr semnificativ de persoane, este necesar să se pregătească în prealabil ace, diapozitive, ochelari cu marginile lustruite, alcool, eter, vată higroscopică din bumbac. Pentru a asigura puritatea diapozitivelor, acestea sunt fierte într-o soluție slabă de sodă, apoi se spală cu săpun în apă caldă, se spală într-o curgere și se șterg cu un prosop curat.
După aceea, ele sunt plasate în borcane închise cu alcool și sunt ținute în ele pentru o vreme.
Sângele este, de obicei, luat din pulpa ultimei falange a degetului inelar sau a degetului mijlociu al brațului stâng. Puncția se face cu ace de unică folosință. Locul injectării este șters cu alcool și apoi cu un tampon de bumbac umezit cu eter pentru uscarea rapidă. Dacă sângele de la rană de la puncție este slab,
Fig. 2. A făcut bine un frotiu de sânge (conform lui GV Epstein, 1940).
apoi masați ușor degetul spre locul injectării sau cereți subiectului să-și flexeze degetele și să facă mai multe mișcări viguroase de flexie cu o perie. Uneori este efectuată oa doua puncție. Atunci când de la un pacient ia câteva lovituri, iar sângele care iese din deget coagulează, este îndepărtat cu vată uscată de bumbac. Când faceți frotiuri, degetul este rotit cu susul în jos. K picătură o picătură de sânge atingeți suprafața inferioară a diapozitivului, retragându-se cu 1,5-2 cm de marginea îngustă. sticlă inversat și apoi să ia mâna stângă și dreaptă - sticlă de diapozitive cu margini lustruite și rupte de pe colțuri și marginea îngustă la un unghi de 45 ° cu privire la o picătură de sânge. Sânge se întinde de-a lungul marginii
Fig. 1. Efectuarea unui frotiu de sânge.
Faw sticlă, după care o mișcare rapidă a acestui sticlă înainte se face printr-o frotiu (fig.1, 2). Acestea din urmă trebuie să fie subțire (eritrocite nu se aplece unul pe celălalt) și poziționat pe partea de mijloc a sticlei înainte de a ajunge la marginile laterale și capătul sticlei, eritrocitelor afectate sunt grupate în mare parte la sfârșitul și la marginile cursei. Cu o astfel de pregătire de medicamente, este convenabil să le examinăm sub microscop.
Când faceți picături groase, degetul este perforat în jos. K proeminente diapozitiv tavă de sânge, în picături, la care și luând 2-3 kaplikrovi zatemigloy unghi sau alt diapozitiv frotiu de sânge pentru a primi diametrul oval de sticlă de aproximativ 1 cm, sau 2-3 cm benzi lungi. Strat de sânge nu trebuie sa fie prea gros, deoarece în ultimul caz, când este uscat, se transformă într-o crustă și se află ușor în spatele sticlei. După ce au făcut picături groase, ele sunt uscate, plasând ochelarii pe o suprafață orizontală. Pentru a accelera uscarea ochelarilor, acestea pot fi plasate într-un termostat (30-35 °). Este necesar pentru a proteja geamul de praf, precum și muște și gândaci de bucătărie, care mănâncă de bună voie de sânge umed și uscat.
Fixarea și colorarea frotiurilor de sânge. Smeile uscate în aer sunt fixate și apoi colorate. Pentru fixare se aplică alcool metilic (fixare 3-5 minute), alcool etilic 96 ° (15 min) sau amestec Nikiforova - alcool etilic absolut și eter în proporții egale (20 min). Blocul poate fi turnat direct pe sticlă, care se află într-o poziție orizontală, sau este mai bine să se utilizeze cupe speciale, în care sunt imersate mai multe medicamente simultan. Reziduurile fixe sunt uscate în aer și colorate folosind metoda Romanovsky-Giemsa.
Soluția de vopsea gata preparată se diluează înainte de utilizare cu apă distilată la o viteză de 1-2 picături pe 1 ml de apă și se pipetează pe frotiurile plasate pe fundul băii de sticlă. Durata de colorare este de 30-45 de minute. După colorare, preparatul este spălat cu un curent slab de apă și uscat în aer. Pe pahar cu un frotiu, poți scrie cu un creion simplu numele pacientului, numărul și data. Această inscripție este bine păstrată.
Apa distilată pentru diluarea vopselei trebuie să aibă o reacție neutră sau ușor alcalină (pH = 7,0-7,2).
Numărul picăturilor soluției de bază pentru un anumit volum de apă și durata de colorare este cel mai bine stabilit pentru fiecare serie individuală de vopsea Romanovsky prin teste preliminare.
Culoarea unei picături groase. Picăturile groase după uscare în aer sunt vopsite cu vopseaua lui Romanovsky - Giemsa fără fixare preliminară. Tehnica de colorare este identică cu cea a colorării unui frotiu. Durata de colorare este de aproximativ 40-45 de minute. Când acest lucru se produce hemoglobina lixiviere din eritrocite și leucocite colorate simultan, trombocite și plasmodii. Dacă picăturile groase necolorate păstrate timp de o săptămână, acestea ar trebui să fie pre-tratate cu apă distilată timp de 10-15 minute, turnând apa direct la droguri. După îndepărtarea apei distilate din sticlă, împreună cu hemoglobina curată, se varsă o soluție de culoare. După colorare cu o picătură groasă, preparatele se clătesc cu apă. Cel mai bine este să spălați produsul scufundându-l într-un borcan de apă, având grijă să nu spălați pictura colorată din sticlă.
Păstrați preparate colorate învelite în hârtie, pachete mici sau mai bine - în folii speciale cu cuiburi pentru fiecare medicament. După microscopie, uleiul de imersie este îndepărtat cu o cârpă moale de flanelă. Pre-uleiul poate fi dizolvat cu benzină purificată. Pentru o mai mare siguranță, este posibil să se facă acoperiri protectoare ale preparatelor cu o soluție de sticlă organică în cloroform.
Pentru a identifica plasmodia, frotiurile de sânge sunt examinate sub microscop cu un obiectiv 90 și un ocular 7, sub iluminare suficient de puternică, cu lumină naturală sau lumină artificială reflectată de o oglindă plată a unui microscop. Diafragma este deschisă complet și iluminatorul este ridicat până la nivelul mesei de microscop. O picătură de ulei de imersie se aplică pe fața subțire a frotiului. După detectarea în prepararea celulelor roșii din sânge, reglați înălțimea iluminatorului și poziția oglinzii.
B frotiu de sânge Plasmodium găsite în celulele roșii sanguine (ris.Z), citoplasmă parazit este colorat de culoare albastru sau gri-albastru, iar nucleul - în diferite nuanțe de roșu. B citoplasmă Plasmodium în pas apare de fapt, Shih umbrelă pigment - boabe mici de culoare maro sau maro închis. Pentru comoditatea studierii paraziților crescători se subdividează condiționat în mai multe etape de vârstă.
Etapa inelului. Forma inelului se formează la 2-3 ore după introducerea în plasmodium eritrocit (merozoit). B mero- zoite format vacuole, citoplasmă și care împinge nucleul la periferie și parazit are o formă inelară cu o margine îngustă citoplasmei cu nici un pigment albastru si rubin nucleul roșu.
Etajul corespunzător schizont. Treptat, se înregistrează o creștere a citoplasmei, în care se introduc granule de pigment și plasmodiu, care intră în stadiul schizontului însuși. Există schizonte mici, medii și mari.
Stadiul schizontului de divizare. În această etapă există o divizare graduală a nucleului în 2-4-8 părți la numărul limitator caracteristic fiecărei specii de plasmodie. Apoi, parazitul se rupe într-un număr corespunzător de merozoiți. Acestea din urmă sunt aglomerări de citoplasmă cu dimensiunea de aproximativ 1,5 μm, conținând un nucleu. Unii dintre merozoiți după implantare în eritrocite se dezvoltă în celulele sexuale imature - gametocite sau gamonți, în citoplasma a cărei pigment este de asemenea depus. Ele sunt o sursă de infecție a țânțarilor din genul Anopheles. În corpul țânțarilor, gametocitele fac o dezvoltare ulterioară. Gametocitele masculine și cele femele, sau microgametocitele și macrogametocitele, se disting. Acestea au (cu excepția P. falciparum) o formă rotunjită și seamănă cu schizonte mari. În P. falciparum gametocitele sunt sub formă de semiluniu. Pentru a determina tipul de plasmodia malarie, trebuie sa cunoasteti caracteristicile lor morfologice in frotiuri si picaturi groase.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: