Pentru indicarea virușilor în materialele infecțioase pot fi utilizate următoarele metode și criterii:
Microscopic: detectarea incluziuni virale în preparatele colorate dar Muromtsev, Morozov, Romanovsky, Pigarevskomu, Pawlowski tratate cu fluorocromi.
Izolarea virusului virusologice în culturi de celule in curs de dezvoltare embrioni de pui la animalele de laborator (stare, simptomele).
In cultura de tesut: hemaglutinarea (RHA) reacția gemadsorbtsii reacție (RGads), efectul citopatic (CPE), testul de culoare, metoda plăcii.
Identificarea virusurilor se face cu ajutorul metodelor serologice (imunologice):
inhibarea inhibării hemaglutinării (RTGA),
reacția de inhibare a hemodisorbției (RTGads),
fixarea complementului (RCC),
reacția de neutralizare a acțiunii citopatogene (PH),
reacția de imunofluorescență este directă și indirectă (RIF, RNIF),
gel de reacție de precipitare (RP),
reacția de neutralizare a culorii.
Cultivarea virușilor în dezvoltarea embrionilor de pui
Ia un pui embrion zi 7-11, verifica viabilitatea lor pe lustruirii, este un embrion in camera de aer rotund plumb creion - punctul principal de referință pentru tampon manipulyatsiy.Sterilnym ulterioară cu iod frecat sus (bont) al oului, apoi la 60 ° alcool.
Infecția unui embrion nedeschis
A) cavitate corionul alantoidian. Asigurați-vă la granița ouălor camerei de aer la 45 ° la suprafață, la o adâncime de 0,3-0,5 cm După materialul viral gaura introducere turnat parafină topită, iar embrionul în tăvi speciale au fost plasate într-un incubator cu termostat la t ° +40 .; + 42C ° și o umiditate de 60%.
B) In amnionic si pui embrion: infecta spinnomozgovyhpunktsy colon ac bont. Manipularea se face într-o cameră întunecată, sub controlul ochiului, odihnindu-se ușor pe embrion.
După infecție, deschiderea este parafinată, iar incubarea embrionului este continuată.
Infecția embrionului deschis:
Efectuați după îndepărtarea foarfecelor curbate să acoperiți ouăle peste camera de aer, care este îndepărtată foarte atent.
A) Infecția în sacul amniotic se efectuează după ce este tras cu pensete sterile.
B) Se efectuează și infecția în sacul de gălbenuș.
B) ambele cazuri, defectul în coajă de ou este închis, fie întoarce capătul capturat bont al carcasei sau capacul flaconului mostră de sticlă. Marginile lor sunt căptușite cu parafină pentru a da o etanșeitate. Plasați într-un incubator incubator.
Observațiile de control sunt efectuate conform următoarelor criterii:
mobilitatea embrionului, ca indicator al viabilității;
apariția pe plicuri de embrioni a plăcilor cu mei din incluziunile virale intracelulare;
indicarea și identificarea comună a virusului (apendicele 3).
REPRODUCEREA VIRUSELOR CU UN GENOME DIFERIT
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: