microscop cu fluorescență (latină Fluo -. Flow, μικρός greacă - .. Și un pic σκοπέω grecesc - uite) - un microscop optic specializat. destinate studierii proprietăților substanțelor organice sau anorganice utilizând fenomenul de fluorescență (luminiscență). În acest caz, este posibil să se efectueze studii de eșantion sub influența radiației UV în lumină transmisă sau reflectată. [1] [2]
Descriere [edita]
Dispozitiv Microscop Olympus BX 51 pentru examinarea eșantioanelor prin epi-fluorescență în lumină reflectată și transmisă
Procesul de absorbție a energiei fotonice de substanțe organice și anorganice, urmat de emisia de raze cu o lungime de undă mai lungă, este cunoscută ca fenomenul de fluorescență (luminiscență). Emisia de lumină de către eșantion, după iradierea cu radiații cu lungime de undă mai scurtă, apare simultan cu debutul absorbției radiației incitante. În acest caz, radiația are o lungime de undă mai mare decât radiația incitantă. În cazul în care timpul de luminescență după întreruperea radiației excitante este mai mult de o microsecundă, procesul se numește fosforescență.
Pentru prima dată acest fenomen a fost descoperit și descris de către englezul George Stokes G. în 1852. El a observat că fluoritul mineral a început să strălucească cu o lumină roșiatică, când a fost iluminat cu raze ultraviolete. Studii suplimentare au aratat ca multe obiecte:., substanțe organice și anorganice, cristale, rășini, uleiuri, clorofilă, vitamine și alții prezintă o fluorescență atunci când sunt iluminate cu raze ultraviolete. Numai în anii 1930 a început utilizarea fluorescenței în cercetarea biologică. Elemente de testare (țesuturi, bacterii, patogeni, etc.) Pentru a identifica oțel vopsele lor colorant fluorescente. Aceasta a servit drept impuls pentru crearea metodei de microscopie fluorescentă.
Principiul de bază al microscopul cu fluorescență este de a iradia proba dat o anumită bandă de lungime de undă care provoacă fluorescența probei. Apoi, este necesar să se izoleze o emisie de fluorescență mult mai slabă. Intr-un microscop perfect reglat, doar lumina fluorescenta de la ochi pentru a ajunge cercetătorul sau detector, astfel încât să rezulte structuri fluorescente alocate cu un contrast foarte mare într-un fundal întunecat (sau negru). Problema este că lumina de excitație, de obicei, în sute de mii și, uneori, de milioane de ori mai strălucitoare decât lumina emisă de fluorescență. Figura prezintă o schemă (în secțiune) a unui microscop fluorescent modern pentru efectuarea de studii în lumină transmisă și reflectată.
Diagrama schematică a microscopului fluorescent include o sursă de radiație ultravioletă, excitarea și blocarea filtrelor termice filtru (căldură) și lentile speciale luminescent. Sursa de lumină emite valuri în regiunea ultravioletă a spectrului care trece prin filtru, unde sunt decupate valuri ale altei serii spectrale. Razele ultraviolete cad pe drogul studiat și provoacă luminiscența acestuia. Lumina luminescentă trece printr-un filtru de blocare care nu trece lumina de excitație (undele ultraviolete) și apoi formează o imagine în lentilă. Pentru efectuarea microscopiei fluorescente se utilizează metoda de iluminare a preparatului în lumină transmisă și metoda de iluminare în lumină incidentă.
Trebuie notat faptul că fluorescența este singura metodă în microscopia optică, în care eșantionul, după excitație, emite el însuși lumină. În acest caz, lumina este radiată sferic în toate direcțiile, indiferent de direcția sursei luminii incitante.
Vezi și [editați]
Note [editați]
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: