Recent, au fost utilizate un număr de metode destinate detectării virușilor sau a componentelor lor în diferite tipuri de materiale clinice pentru diagnosticarea rapidă a infecțiilor virale. De fapt, ele pot fi atribuite metodelor de diagnostic virologic sau serologic; ele se caracterizează prin specificitate ridicată și sensibilitate.
Reacția de imunofluorescență. RIF utilizate în realizările directe și indirecte (vezi. Sect. 1.4.5) pentru detectarea virusului în materialul obținut de la pacienți, în culturi de celule infectate și a corpului animal (vezi Tabelul 3.2.).
Microscopie electronică cu microscopie. IEM permite detectarea particulelor specifice virusului legate în mod specific de anticorpi. Avantajul acestei metode este concentrarea simultană a virusului și identificarea acestuia cu ajutorul unui ser specific. modificări sugerate IEM furnizează procesarea materialului virusosoderzhaschego antiser în titru înalt, adăugând la reziduu de acid fosfowolframic sau acetat de uranil, urmată de aplicarea filmului (substrat), și uscare. Clusterele de particule virale sunt observate în microscopie electronică.
IEM este de asemenea folosit pentru detectarea în poliovirusul material biologic, citomegalovirus, virusurile hepatitei A și B, adenovirus necultivate în țesutul amigdalian, enterovirus necultivate si rotavirus in fecale, virusul variolei in detritus variola.
Tabelul 3.2 Diagnosticul infecțiilor virale cu ajutorul RIF
Material pentru imunofluorescență
infecție
de la pacienți pentru diagnosticarea expresă a celulelor infectate și a culturilor animale pentru detectarea și identificarea virusului gripal
parainfluenza
adenovirusul
Naya
mască de gaze
dar-Sintsov
tialnaya
pojar
Celulele epiteliale descoperite de pasaje nazale, bucăți de plămâni și trahee obținute prin autopsie
La fel
Soskob cu conjunctiva Acelasi
Celulele epiteliale din sedimentele urinare, spălările din faringe, leucocitele din sânge, biopsia și preparatele secționale ale creierului
Culturile primare ale celulelor renale de maimuță, celule epiteliale ale pasajelor nazale de la dihori experimentați infectați
Culturi de celule renale de maimuțe, embrioni umani, SOC, HEp-2
Culturile de celule (Held, NEP-2, KV etc.)
Culturile culturilor (HEp-2, Hela, uman diploid) Rubella
Enterovirus naya
Medicamente secundare ale miocardului (Coxsackie), celule epiteliale în sedimentul de urină
Culturi de rinichi de iepure, maimuță, RK, Vero, SIRK, celule BHK-21 Celule de rinichi de maimuță
Culturi de celule de rinichi de maimuță Parotitis
furie
Gerpetiche
Skye
Preparate bioptice ale creierului
Smearurile din conținutul veziculelor, răzuirea veziculelor și a corneei, preparate secționale și biopsie ale creierului
Culturi de celule renale de maimuțe, amnion uman, fibroblaste de pui
Smears-imprimări ale creierului și glandelor salivare ale șoarecilor infectați
Culturi de celule diploide WI-38, fibroblaste; segmente de țesut cerebral de șoareci infectați Virali
infecție Material pentru studiile de imunofluorescență de la pacienți pentru diagnosticul expres de la celulele infectate și culturile animale pentru a identifica și identifica virusul Cytomegalovirus Pox veterinar
natural
variolă
arbovirus
Rotavirusul hepatitei B Celule albe din sânge
Smears din conținutul veziculelor
Soskoby cu macula și papule, frotiuri din conținutul veziculelor
Leucocite de sânge (cu hemoragie Crimeea, dengue, febra Colorado)
Biopsie și preparate hepatice secționate
Celule de stomac și intestine din fecale Culturi de celule diploide R7-38, fibroblaste Același
Culturile de celule de origine epitelială Hela, Vero și colab.
Culturi de celule embrionare de pui, rinichi de embrioni de porc, VNK-21, SPEV, PES; preparate ale glandelor salivare ale vectorilor, hemolimf de căpușe Imunoelectroforeză contrare.
RVIEF un diagnostic virusologic este larg utilizat pentru detectarea în seruri de la pacienți fără anticorpi și antigene de suprafață (de exemplu, HBsAg la pacienții cu hepatită B), precum și pentru a identifica alte antigene virale, având o sarcină negativă.
Un strat de agar se aplică pe placa de sticlă. După întărire, se taie două rânduri paralele de găuri. Antigenii sunt plasați în godeurile situate mai aproape de catod, iar anticorpii sunt plasați în godeurile mai aproape de anod și se efectuează electroforeza. HBsAg, având o sarcină negativă, se deplasează la anod și anticorpi la catod. Apoi, ochelarii sunt plasați într-o cameră umedă și după 12-24 ore rezultatele reacției sunt luate în considerare prin formarea liniilor de precipitare între antigenul dorit și anticorp.
Reacția de hemadsorbție pe o bază solidă. RHADMST poate fi considerată o combinație de ELISA și RNGA. Sensibilitatea ridicată a reacției face posibilă aplicarea acesteia pentru diagnosticarea rapidă a infecțiilor virale.
Metodologie. Godeurile panourilor de unică folosință din polistiren sunt tratate cu imunoglobulină (ser imun) și se introduce o suspensie din materialul de test care conține antigenul.
După 30 - 60 de minute, godeurile au fost spălate de câteva ori cu tampon, s-a adăugat o suspensie de eritrocite acoperite cu imunoglobulină specifică, și 30-60 minute mai târziu a determina prezența hemaglutinare.
Dacă materialul conține un antigen specific, acesta se leagă serului adsorbit pe suprafața sondelor, și, la rândul lor, se leaga de imunoglobulinele de suprafață eritrocit. Ca rezultat, există agregarea celulelor roșii din sânge (hemaglutinarea). În modificarea descrisă, reacția este utilizată pentru a detecta antigene de rotavirusuri și alți viruși în fecalele pacienților.
Metode biologice biologice. PCR și alte metode de genodiagnostică, utilizate pentru diagnosticarea expresă a infecțiilor virale, sunt descrise în detaliu în p. 1.7.
Alegerea metodelor de diagnosticare în laborator a infecțiilor virale individuale este determinată de natura bolii, de caracteristicile clinice ale cursului, de proprietățile biologice ale agentului patogen, de perioada de boală și de capacitățile laboratorului.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: