Ehrlich diazoreaction este un test calitativ de detectare a substanțelor biologic importante în sânge și urină. Pe baza reacției de culoare nespecifică între diazoreaktivom Ehrlich și unele substanțe organice (piro, cresol, indican, proteine care cuprind aminoacidul tirozină, triptofan, histidină și alții.).
Diazoreacția în urină. Reactivi: 1) diazo-reactiv (0,5 g acid sulfanilic și 5 ml soluție 25% de acid clorhidric în 100 ml apă); 2) soluție 0,5% de nitrit de sodiu.
Procedură pentru această reacție: se adaugă 1 până la 2 picături de reactiv II în 4 ml de reactiv I, se adaugă 4 ml de urină, apoi 1 ml de soluție de amoniac 10%; tubul este închis cu un dop și lichidul este agitat până când apare spuma. Eșantionul este considerat pozitiv pentru roz sau roșu și negativ pentru galben sau portocaliu. O reacție pozitivă este observată în multe boli febrile: abdominale și tifos. tuberculoza miliară, chlamydia, rujeolă, trichineloză și altele. În prezența bilirubinei în urină apare diazoreaktivom culoarea roșie a urinei înainte de adăugarea de amoniac.
Diazoreacția în sânge. Se folosește la determinarea bilirubinei cu care un amestec de diazo-reactivi în anumite raporturi dă o culoare roșie. Diazoreacția lui Ehrlich subliniază cele mai multe metode de determinare cantitativă și calitativă a bilirubinei (a se vedea).
Paul Ehrlich, 1915
reacția Ehrlich diazo (P. Ehrlich) - reacție de culoare între diazoreaktivom Ehrlich și un număr de substanțe organice (piro, cresol, indican și colab.), Intrarea într-un compus cu gruparea azo (-N = N-), utilizat pentru determinarea cantitativă a substanțelor biologice importante în sânge și urină.
Diazoreaktiva Mod de preparare: o soluție de 5 g de acid sulfanilic în 50 ml de acid clorhidric concentrat (d = 1,12), se adaugă apă până la un volum de 1 litru; O soluție de azotat de sodiu 0,5% se adaugă la soluția rezultată. Aceasta formează acidul diazofenilsulfonovaya (reactivul Ehrlich), care formează un compus azoic colorat cu anumite substanțe biologice importante din sânge și urină.
Utilizarea pe scară largă a diazoreacției Ehrlich a fost efectuată în clinică cu o determinare calitativă și cantitativă a bilirubinei în sânge (a se vedea mai jos). Diagnosticitatea este, de asemenea, utilizată pentru a determina tirozina, histidina și histamina. Proteinele, în care molecula include aminoacizi - tirozină, triptofan și histidină, dau o culoare roșu portocalie cu un reactiv diazo. Atunci când se determină anumite substanțe ca un component pentru a produce un compus azoic colorat folosit nu acidul sulfanilic, și alți compuși ciclici, cum ar fi fenolii care determină sânge și urină - paranitroanilină, când sulfonamide care determină - 2R acid, etc ...
Diazoreacția în sânge. Bilirubina cu diazoreacție dă o colorare caracteristică roșu-violet. Acest fenomen a fost utilizat pentru majoritatea metodelor de determinare calitativă și cantitativă a bilirubinei de sânge. La ora actuală, metoda Endrashik este cea mai frecvent utilizată, ceea ce face posibilă determinarea separată a fracțiilor de bilirubină.
Reactivi: a) reactiv cafeină: 5 g de cafeină, 7,5 g de benzoat de sodiu și 12,5 g de acetat de sodiu dizolvat la o mică încălzire în apă distilată și se completează până cu apă până la 0,1 l; b) diazoreaktiv: primul reactiv - 1 g de acid sulfanilic dizolvat într-o cantitate mică de apă și prin adăugarea a 15 ml de acid clorhidric concentrat, completat cu apă până la 1 litru; al doilea reactiv este o soluție 0,5% de nitrit de sodiu.
Înainte de utilizare, se amestecă 10 ml din primul reactiv și 0,25 ml din cel de-al doilea. Pentru determinarea bilirubinei totale în 1 ml de ser se toarnă 3,5 ml de reactiv cafeină și 0,5 ml diazoreaktiva și determinarea bilirubinei directe cu 1 ml de ser a fost adăugat 3,5 ml soluție salină și 0,5 ml diazoreaktiva. Se amestecă bine, ambele probe după 5 minute. colorimetru împotriva soluției de compensare constând din 1 ml de ser, 3,5 ml de reactiv de cofeină și 0,5 ml de soluție fiziologică cu un filtru verde. Bilirubina indirectă este determinată prin scăderea din direcția comună directă.
reacția diazo în urină constă în adăugarea a 10 ml de urină diazoreaktiva proaspete 10 ml și 2 ml soluție de amoniac 10%. În acest caz, după o agitare viguroasă, apare colorarea roz sau carmin-roșu. Reacția este considerată pozitivă dacă nu numai că este lichid, ci și spumă formată. Culoarea galbenă sau portocalie indică un rezultat negativ. In cazuri incerte, formarea a doua zi precipitatul de culoare albastru-verde sau negru sugerează o reacție pozitivă. În prezent, această reacție este de nici o valoare practică, deoarece nu este specifică, și este tipic pentru multe boli febrile: tifos tifoidă și tifos, tuberculoza miliară, poliserozita, rujeola, boala Hodgkin, pneumonie, difterie, erizipel, trichineloză. In plus, medicamentele: opiu, morfină, dionin, atofan, hexametilentetramina, revent, heroină, Chrysarobin, salvarsan - da colorație și preparate similare tanin, fenol și derivați ai acestuia, cresol, guaiacol și salol interferează cu reacția.
Articole similare
Trimiteți-le prietenilor: