Metode de determinare a bifidobacteriilor

Datorită faptului că bifidobakterin sunt anaerobe, când sunt crescute în mediu de creștere contribuie cel mai mult agenți de reducere, care mențin un potențial redox scăzut în mediu. Ca, agenții reducători utilizați sunt acidul ascorbic, sulfitul de calciu, clorhidrat de cisteină, părți ale organelor interne ale animalelor, glucoză, glyugation, sulfit de sodiu, tioglicolat de sodiu. Prezența acestor substanțe în mediile nutritive permite cultivarea bifidobacteriilor în „tuburile care conțin coloană înaltă medie semilichid.







Bifidobacteriinul este sensibil la mediul pH. Cercetătorii recomandă folosirea mediilor nutritive pentru cultivarea bifidobacteriilor cu pH în intervalul 6.2-7.5. La pH sub 5,0, se suspendă creșterea bifidobacteriilor. Este o selecție formidabilă sarcină bifidobacteriilor a probelor, contaminarea cu microorganisme anaerobe străine precum și o serie de alte microorganisme. Dificultatea constă în faptul că acest grup de microorganisme necesită prezența în mediul unui set mare de nutrienți și sensibilitatea la diferiți inhibitori. La alocarea bifidobacteriilor a probelor, contaminarea microflora străine în mediu nutritiv se face indicatori (aniliiblau, hinablau), prin care coloniile de bifidobacterii vopsite în diferite culori.

Pentru separarea selectivă a fecalelor Bifidobacteria dezvoltat BS-Arap I și II (Mitsuoka) și Henel agar selectiv și pentru izolarea produselor lactate sunt utilizate NPNL agar și modificat Rogosa agar. În aceste medii ca agenți selectivi adăugat kanamicină, neomicină, clorură de litiu, azidă de sodiu, acid sorbic, care inhibă creșterea bacteriilor coliforme în principal. Au fost dezvoltate medii selective pentru cultivarea anumitor tulpini de bifidobacterii.







Metoda de pahare de ceas. Se prepară un număr de zece ori diluții ale produsului de testare sau fecalelor. Se utilizează două medii nutritive: un mediu dens pentru creșterea lui B. prodigiosum și mediul Henel pentru creșterea bifidobacteriilor.

Mediul Henel este turnat în vase Petri, topit și răcit la 40-45 ° C. După ce agarul este congelat, vasele Petri sunt plasate într-un termostat la 37 ° C pentru a usca agarul. Pe suprafața uscată a agarului se aplică picături de diluții de test și partea superioară este închisă cu o sticlă de ceas cu cultura B. prodigiosum. Apoi, aceste vase sunt agitate într-o baie de gaz la 37 ° C timp de 48 h. Coloniile rezultate din bifidobacterii au o culoare albastră. Se calculează numărul de colonii crescute la diluții diferite: în 1 g de ml (34). În plus, coloniile pot fi încrucișate într-un mediu nutritiv semi-lichid pentru cultivarea și efectuarea unor studii fiziologice suplimentare și identificarea bifidobacteriilor.

Semănarea în eprubete cu o coloană înaltă de mediu nutritiv. Se prepară un număr de diluții de zece ori, în conformitate cu contaminarea preconizată a produselor studiate. La prepararea diluțiilor, aerul trebuie evitat să pătrundă în eprubete în timpul amestecării și să se transfere în tuburile de testare ulterioare.

Ca mediu, pot fi utilizate Blaurock, hidrolizat-lactic, porumb-lactoză și alte medii (vezi 142).

coloana inalta un nutrient tuburi încălzite mediu într-o baie de apă timp de 10-15 minute, apoi se răcește și se însămânțează în diluții adecvate le rapid. După solidificare tuburile de agar plasate într-un incubator la 37 ° C și a avut loc timp de 48-72 ore. La sfârșitul perioadei de incubare înregistrate de diluare în care este marcat creșterea bifidobacterii, conta -bifidobaktery numărul (sub formă de boabe de hrișcă, fire sau știfturi) în reproducere și determinarea numărul de celule bacteriene în 1 ml. Se observă intensificarea creșterii bifidobacteriene în direcția fundului tubului. Când mikroorganyzmoz o creștere masivă a indicat, de obicei, prezența zonei sterile în porțiunea superioară a mediului nutritiv, înălțimea zonei sterile este diferit pentru diferite tulpini.

Cu o microfloră mixtă de produse lactate fermentate, pot fi utilizate medii nutritive care conțin unele antibiotice care suprimă creșterea bacteriilor acidului lactic dar la care sunt rezistente bifidobacteriile.







Articole similare

Trimiteți-le prietenilor: